名词解释:Tm值

名词解释:Tm值

问题补充说明：名词解释

Tm值就是DNA熔解温度，指把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度。不同落感序列的DNA，Tm值不同。DNA中G－C含量越非福初高，Tm值越高，成正比关系。

核酸Tm值（解链温报度）计算

评价标准是核酸所吸收的光线量达到其所增加吸收260n来自m光线的量的两倍达到的温度，

当核酸达到Tm值时，其260nm吸收量可增加百分之四十（紫外吸收量随解体程度而增加，直至完全解体。

长度为25mer以下的引物，Tm计算公360问答式为：Tm=4℃(G+C)+2℃(A+T)

对于更长的寡聚核苷酸语危念财玉并让岁足，Tm计算公式为：

Tm=81.5+16.6xLog10[Na+]+0.41(%GC)–600/size

公式中，Size=引物长度。

多种因素影响杂交的DNA的两条链之间的效率。这些包括杂交分子（DNA或RNA），其长度的性质，杂交环境（盐浓度和变性剂），探针浓度，并且它们的序列。

为膜结合的目标和中等长度的DNA探针，豪利等确该定的融解温度（Tm），在该探针的50%进行退火以它的互补链被定义为：

TM=81.5+16.6logM+41（%G+%C）-500/L-0.62F

其中

M=摩尔一价阳离子的浓度

%XG或C=G和C核苷酸的各馏分中的探针

L=长度退火的产物

F=摩尔甲酰胺浓度

例如，与序列AGGTCATTG短寡核苷酸探市半卫兰针在75mM的溶液未经甲酰胺具有预测的Tm=81.5+16.6log（0.075）+41（律翻白首友数江你0.33±0.11）-损史她斗苏钢省住积也9分之500-0.62代味妒振阻较解别酸（0）

=24.1℃，

这个方程是不适合的探针小于约50个核苷酸。这个等式的修饰包括

RNA的TM=79.8+18.5logM+58.4（%G+%C）11.8（%G+%C）2-820/L-0.35F

一种RNA-DNA杂交=79.8+18.5logM+58.4（%G+%C）11激.8（%G+%C）2-820/L-0.50F的TM

较大的数字反映了RN握度点迅代光A形成杂交的稳定性增加。

对于寡核苷酸，华莱士等确定

TD=2（A+T）4（C+G），其中TD=温度（℃），其中所述寡核苷酸的50%被退火到其膜结合的互补序列。在探头的每个特定核苷酸的数目被插入方程代替字母。该方程是在0.9M氯化钠短（14-20聚体）是有用的。

例适汉耐素如：对于序列AGGTCAT饭苏转挥扩被特系简TG，在TD=2（2+3），4（1+3）=2穿见然改集光护这六叶群6°C

当目标和探头都是免费的溶液中，加入7-8℃，到TD社温父支逐气皇他。

熔融温度在溶液中通过绘制OD相对于温度来确于矛什减意质顾进继硫汽定。S形曲线的中间点是资熔融温度。

熔点的其他估计基文医急住食担容会于近邻分析（由Genosys5审查）已被确定为DNA3或RNA4。布雷斯劳尔，等[3]发现，熔化DNA双链的行为是其一级序列可预测的。

在这里，

TM=1000（DH）/[A+DS）+喉返神经（CT/4）]-273.15+16.6log（钠离子）。

其中

DH=的近邻焓变的和移动的一个基站在同一时间，通过序列

A=校正配对的起始（=-10.8）

DS=最近邻熵的变化的总和

R=1.987卡度-1摩尔-1）

克拉是链的摩尔浓度。

自我互补链，术语“CT/4”被替换为衣原体。